Microscópio Óptico de Luz Transmitida e Fluorescência - Axio Imager Z2 ApoTome.2 - Zeiss
O microscópio possui sistema de iluminação transmitida com lâmpada halógena de 100W (para campo claro, campo escuro e DIC – “DIFFERENTIAL INTERFERENCE CONTRAST”), iluminação refletida com lâmpada de haleto metálico de 120W (para epifluorescência) e câmeras digitais com sensibilidade para todas as referidas técnicas de microscopia ótica. Estão disponíveis vários objetivas e filtros para fluorescência – veja tabelas. É possível análise e aquisição automática de imagem, escaneamento e “stitching/tiling” de múltiplas imagens e sistema ApoTome que aumenta resolução na direção z, com formação de imagens 3D.
Tipos de aquisição de imagem:
- Imagem individual (2D convencional);
- Tiles: obtenção de uma imagem composta pela união de várias imagens de diferentes regiões da amostra;
- Z-stack: obtenção de imagens de diferentes planos focais na amostra, permitindo a geração de imagem 3D.
Métodos de contraste de imagem:
- Campo claro: para análise de amostras coradas.
- Campo escuro: para análise de amostras não coradas, com geração de imagem clara do objeto em um fundo escuro.
- Contraste por Interferência Diferencial (“DIC”): não requer coloração da amostra e permite bom contraste com impressão de imagem 3D.
- Fluorescência: para análise de amostra marcada com fluoróforo ou que apresenta autofluorescência. Uso do Sistema ApoTome no caso de fluorescência intensa e também amostras espessas, com redução de sinais fora de foco.
Características das objetivas:
| Objetivasa | Abertura numérica (“NA”) | Distância de trabalho (mm) |
Requer lamínulac | Uso com ApoTome | Campo escuro | |
| 10x | 0,3 | 5,2 | Não | Não | Sim | |
| 20x | 0,8 | 0,55 | Sim | Sim | Não | |
| 40x | 0,6 | 2,5 – 3,3b | Sim | Sim | Não | |
| 40x – óleo | 1,3 | 0,21 | Não | Sim | Não | |
| 63x – óleo | 1,4 | 0,19 | Sim | Sim | Não | |
| 100x – óleo | 1,4 | 0,17 | Sim | Sim | Não | |
a Todas objetivas podem ser usadas para fluorescência (preferencialmente NA > 0,6), “DIC” e campo claro.
b Objetiva de longa distância de trabalho, com colar de correção.
c Para todas as objetivas que requerem lamínula, esta deve possuir 0,17 mm de espessura.
Filtros para imagem de fluorescência:
| Cubos de filtros | Comprimentos de onda de excitação (nm) | Comprimentos de onda de emissão (nm) |
| 49 DAPI | 365 | 420 – 470 |
| 38 GFP | 450 – 490 | 500 – 550 |
| 43 CY3 | 537 – 562 | 570 – 640 |
| 63 mRFP | 559 – 584 | 598 – 660 |
| 50 Cy5 | 625 – 655 | 665 – 715 |
Coordenação:
Prof. Gregory Thomas Kitten
Microscopistas:
Priscila D. D. Alves
Email:
Sessão remota:
Microscópio Óptico de Fluorescência – ApoTome-Zeiss Axio Imager Z2 – Apotome 2
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